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吉姆薩染液由天青，伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。但本法對細(xì)胞核和寄生蟲著色較好，結(jié)構(gòu)顯示更清晰，而胞質(zhì)和中性顆粒則著色較差。基本方案實驗材料原位雜交玻片試劑、試劑盒吉姆薩染色液磷酸鈉緩沖液乙醇二甲苯儀器、耗材染色盤培養(yǎng)箱濾紙實驗步驟1.將顯影的玻片置于玻片架上，浸入盛有水的染色盤中。（1）1個盤：pH6.810mmol/l磷酸鈉緩沖液，所配的25倍稀釋的吉姆薩染液。（2）3個盤：水。（3）脫水系列溶液：①3個盤：分別盛50%、70%和95%乙醇。②2個盤：盛有...

蛋白提取組織樣本總蛋白提?。ㄐ∈蟾谓M織）1、頸椎脫臼處死小鼠，75%乙醇擦拭皮膚，剪開腹腔，剪切肝臟組織。2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL。3、稱取0.6g左右肝組織，在平皿中剪碎組織，并轉(zhuǎn)移到勻漿器。4、預(yù)冷裂解液中添加PMSF（20ug/2ml）。5、取2ml預(yù)冷裂解緩沖液，迅速加入勻漿器，冰浴條件下充分研磨。6、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管。7、4℃，15000rpm，離心10min。8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。9、進(jìn)行蛋白定量，-80...

1.對于貼壁細(xì)胞或細(xì)胞涂片PBS洗滌一次。2.如果細(xì)胞貼得不牢，可以干燥樣品使細(xì)胞貼得更牢。3.用4%多聚甲醛固定細(xì)胞15分鐘，用PBS洗滌一次。4.將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內(nèi)源性過氧化物酶封閉液，室溫孵育10分鐘，PBS充分淋洗；5.滴加正常山羊血清封閉液，室溫30分鐘，甩去多余液體；6.滴加一抗工作液，37℃孵育2h（或4℃過夜），然后PBS充分淋洗；7.滴加兔/鼠二抗工作液，室溫孵育1h，PBS充分淋洗；8.DAB顯色5-10分鐘，在顯微鏡下掌握...

一般使用辣根過氧化物酶HRP-ECL發(fā)光法或堿性磷酸酶AP-NBT/BICP顯色法。1．HRP-ECL發(fā)光法：將A、B發(fā)光液按比例稀釋混合。膜用去離子水稍加漂洗，濾紙貼角吸干，反貼法覆于A、B混合液滴上，熄燈至可見淡綠色熒光條帶（5min左右）后濾紙貼角吸干，置于保鮮膜內(nèi)固定于片盒中，迅速蓋上膠片，關(guān)閉膠盒，根據(jù)所見熒光強(qiáng)度曝光。取出膠片立即*浸入顯影液中1～2min，清水漂洗一下后放在定影液中至底片*定影，清水沖凈晾干，標(biāo)定Marker，進(jìn)行分析與掃描。2．AP-NBT/B...

目的：研究楊梅苷對大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法：60只SD大鼠隨機(jī)分為6組:正常對照組、模型組、陽性給藥組(維拉帕米100μg/L)和楊梅苷低中高劑量組(2.5,5,10mg/L),每組10只。釆用Langendorff離體心臟灌流技術(shù),停灌30min,再灌45min,造成心肌缺血再灌注損傷模型。記錄楊梅苷對心臟血流動力學(xué)指標(biāo)的影響,測定冠脈流出液中心肌三酶LDH、CK、AST的水平,心肌組織中抗氧化酶SOD、CAT的活性及脂質(zhì)過氧化物MDA的含量。HE...

目的：探討和比較不同干預(yù)方案下辛伐他汀對去卵巢大鼠骨丟失和骨質(zhì)量下降的干預(yù)效果。方法：3月齡雌性SD大鼠32只,隨機(jī)分為4組,每組8只:假手術(shù)(A)組、卵巢切除(B)組、卵巢切除加辛伐他汀前半程干預(yù)組(C)和后半程干預(yù)組(D)。除A組接受假手術(shù)外,其余各組大鼠行雙側(cè)卵巢切除術(shù),C組于術(shù)后給予辛伐他汀(5mg/kg/d)干預(yù)10周后停藥,D組于術(shù)后10周開始接受辛伐他汀干預(yù)。術(shù)后20周處死所有大鼠,采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測血清I型前膠原氨基端前肽(PINP)、I...

目的：擬研究心室肌細(xì)胞外基質(zhì)能否促進(jìn)植入心肌梗死心肌組織內(nèi)的心肌球源性心肌干細(xì)胞（CDC）向心肌細(xì)胞，血管內(nèi)皮及血管平滑肌細(xì)胞分化，改善大鼠心肌梗死后的心臟結(jié)構(gòu)及功能。方法：心肌組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)CDC，脫細(xì)胞法配置ECM，結(jié)扎Wistar大鼠前降支建立急性心肌梗死模型。分別向心肌梗死心肌組織內(nèi)注入IMDM（I組），ECM懸液（E組），含106CDCs的IMDM溶液（IC組），含106CDCs的ECM懸液（EC組），每組心肌梗死大鼠6只。3周后心臟彩超評估心臟功能，Masson...